Polymerase sèine-bhualadh agus a nàdar agus rùn

Polymerase slabhraidh reaction (PCR) - dòigh Mhoileciuilich bith-eòlas, a leigeas le bhith a 'lorg stuth bith-eòlasach ann an suimean beaga de deoxyribonucleic acid (DNA), no an àite, cuid de na mìrean, agus iomadaich dhaibh iomadh turas. An uair sin bha iad a 'comharrachadh lèirsinneach le glaineid electrophoresis. Tha reaction chaidh a leasachadh ann an 1983 le K. Mullis agus a-steach anns an liosta de leth a lorg o chionn ghoirid bliadhna.

Dè na dòighean PCR

Tha modh-obrach air fad a tha stèidhichte air comas nucleic acids fèin-mac-samhlachadh ann an sin a 'chùis seo a chumail artificially ann an obair-lann. DNA samhlachadh nach urrainn rithist sgìre sam bith de na moileciuil sa chruinne, ach a-mhàin ann an sgìrean le sreath de nucleotides sònraichte - a 'tòiseachadh criomagan. Ann an òrdugh airson an polymerase slabhraidh reaction air tòiseachadh, feumaidh sinn primer (no probes DNA). Tha iad seo goirid criomagan de DNA le sreathan a thoirt nucleotide sreath. Tha iad co-phàirteach (i.e., a rèir a) an toiseach shampall DNA cuibhrionnan.

Gu dearbh, a chruthachadh primers, feumaidh ionnsachadh saidheans an òrdugh nucleotides an nucleic acid, a tha an sàs ann am modh-obrach. Tha iad sin a DNA probes cinnteach specificity an-bhualadh agus a chiad. Polymerase slabhraidh reaction nach tèid, ma tha an sampall Chan eil a 'lorg co-dhiù aon de na moileciuil sa chruinne-mhiannaichte DNA. Anns an fharsaingeachd, feumaidh am barail gu h-àrd primers, seata nucleotides, teas-dhìonach DNA polymerase. Tha an dàrna tha an enzyme - catalytic bhualaidhean de tuigseach ùra nucleic acid molecules air sampall stèidh. Tha iad seo uile stuthan, nam measg bith-eòlasach a 'chùis, a tha riatanach gus a chomharrachadh DNA a tha còmhla a-steach measgachadh reaction (fhuasgladh). Tha e air a chur ann an sònraichte thermostat a 'coileanadh an uabhasach luath teasachadh agus fuarachadh taobh a-staigh an ùine a shònrachadh - cearcall. Tha iad mar as trice 30-50.

Ciamar a tha seo reaction

Tha brìgh a seo gu bheil aig aon cearcall, an primers tha ceangailte ri na pàirtean den DNA mhiannaichte, an dèidh a tha e a 'dol le bhith a' dùblachadh an enzyme. Air bunait nan thoradh DNA dualan synthesized an dèidh sin chuairtean barrachd is barrachd pìosan co-ionann molecules.

Polymerase slabhraidh reaction gu cunbhalach air ais a 'leantainn a cheumannan. Tha e air a chomharrachadh le 'chiad dùblachadh an t-sùim de bathar aig gach cearcall teasachaidh agus fuarachaidh. Anns an dara ceum de ath-bhualadh a 'tachairt deceleration bho na enzyme a mhilleadh agus a' call obair. A thuilleadh air sin, an lughad stocan de nucleotides agus primers. Ann an ìre mu dheireadh - tha an còmhnard - bathar nach eil cruinneachadh mar reagents thairis.

Far a bheil e air a chleachdadh

Gun teagamh sam bith, a 'fharsainge iarrtas polymerase slabhraidh reaction lorgas ann an leigheas is saidheans. Tha e air a chleachdadh ann an poblach agus prìobhaideach bith-eòlas, lighiche-sprèidh stuth-leigheis, bùth-leigheadaireachd, agus fiù 's eag-eòlas. Ged a tha an dàrna a 'dèanamh gus sùil a chumail air càileachd biadh agus àrainneachd rudan. Ghnìomhach a chleachdadh polymerase sèine-bhualadh ann an foireansach chleachdadh gus dearbhadh Fòrladh Athaireil is aithneachaidh de dhearbh-aithne cuideigin. Ann an galair-saidheans, a thuilleadh air ann an paleontology, gu tric an dòigh seo a tha an aon dòigh, oir tha e mar as trice ri fhaotainn airson sgrùdadh na uabhasach beag suim DNA. Gu dearbh, gu math bitheanta an dòigh a lorg ann an obair-leighis. Dh'fheumadh e rithe ann an roinnean leithid gintinneachd, galaran gabhaltach agus oncological.